PCR擴增(zeng)儀如何驗證(zheng)

1971年，Dr. Kjell Kleppe在(zai)Journal of molecular biology期刊發表(biao)的(de)文章中準(zhun)確、客觀地(di)闡述了(le)PCR方(fang)法。

1985年，美國PE-Cetus公司的(de)Kary Mullis等人發明PCR技術。它推動了(le)現(xian)代醫學(xue)由(you)細胞水(shui)平向分(fen)子水(shui)平、基因(yin)水(shui)平發展，是DNA測序的(de)基礎，它成為現(xian)代分(fen)子生(sheng)物學(xue)發展過程中的(de)一座(zuo)里(li)程碑。Mullis等也因(yin)此獲得了(le)1993年的(de)諾貝爾獎。

1：什么是PCR擴(kuo)增儀呢？

PCR擴(kuo)增(zeng)(zeng)儀(yi)又稱(cheng)為PCR基因擴(kuo)增(zeng)(zeng)儀(yi)、PCR核酸擴(kuo)增(zeng)(zeng)儀(yi)、聚(ju)合酶(mei)鏈反應(ying)核酸擴(kuo)增(zeng)(zeng)儀(yi)，是利用(yong)PCR(Polymerase chain reaction，聚(ju)合酶(mei)鏈反應(ying))技術(shu)對(dui)特定(ding)DNA擴(kuo)增(zeng)(zeng)的(de)(de)一種儀(yi)器設(she)備，被廣泛(fan)運用(yong)于醫(yi)學、生物學實(shi)驗室中，例如(ru)用(yong)于判斷檢(jian)體(ti)中是否會表現某遺傳疾(ji)病(bing)的(de)(de)圖譜(pu)、傳染病(bing)的(de)(de)診(zhen)斷、基因復制以及親子(zi)鑒(jian)定(ding)等(deng)。

2：PCR擴增儀的工作原理是(shi)什么呢？

PCR技術的(de)原理類(lei)似于DNA的(de)天然(ran)復制(zhi)過程，其特異性(xing)依賴于靶序列兩端互補的(de)寡(gua)核苷酸引(yin)物，由變性(xing)-退火-延(yan)伸三個基本反(fan)應步(bu)驟構成(cheng)。

3：PCR擴(kuo)增儀(yi)為什么要做驗證呢(ni)？

一般來講升(sheng)降(jiang)溫(wen)(wen)速度(du)(du)越(yue)快，實驗需(xu)要(yao)的時間(jian)越(yue)少(shao)，時間(jian)越(yue)少(shao)意(yi)味著在中間(jian)溫(wen)(wen)度(du)(du)可能產(chan)生的非特異擴增(zeng)越(yue)少(shao)，并且(qie)通(tong)常(chang)升(sheng)降(jiang)溫(wen)(wen)速也反(fan)應了設備控溫(wen)(wen)能力的好壞，一個(ge)穩(wen)(wen)定(ding)的溫(wen)(wen)度(du)(du)循(xun)環(huan)是成功實現PCR所(suo)必需(xu)的。其中溫(wen)(wen)度(du)(du)控制的動、穩(wen)(wen)態(tai)特性(xing)(xing)是影響PCR擴增(zeng)結(jie)果(guo)正確與否的重要(yao)因(yin)素(su)之一, 這包括溫(wen)(wen)度(du)(du)準確性(xing)(xing)、升(sheng)降(jiang)溫(wen)(wen)速度(du)(du)、溫(wen)(wen)場均(jun)勻(yun)性(xing)(xing)、max超調溫(wen)(wen)度(du)(du)，需(xu)要(yao)驗證后方能繼續使用。

4：PCR擴增儀驗(yan)證項目如下

4.1 安裝確(que)認

4.2 運(yun)行(xing)功(gong)能(neng)確(que)認

4.3 溫度示值誤差測(ce)試

4.4 溫度均勻(yun)度測試

4.5 溫度(du)最(zui)大(da)過沖測試

4.6 平均升(sheng)降(jiang)溫(wen)速率測試(shi)

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